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【風(fēng)險監(jiān)測】淡水魚中地西泮、奧沙西泮殘留量的檢測
發(fā)布日期:2024/3/4

淡水魚中地西泮和奧沙西泮殘留量的檢測

SPE-UPLC-MS/MS法


地西泮、奧沙西泮是一類中樞系統(tǒng)鎮(zhèn)靜劑,主要用于人和動物鎮(zhèn)靜、催眠的治療,同時還可以用作動物的增重促進(jìn)劑。因此促使了非法使用該類藥物,用于淡水魚的飼養(yǎng)和運(yùn)輸,導(dǎo)致在淡水魚體內(nèi)會有部分殘留,當(dāng)人們攝入這些藥物后,肝臟負(fù)擔(dān)增重、頭腦昏沉、運(yùn)動和肌肉功能受到抑制。

 

迪馬科技參考相關(guān)方法,建立了SPE-UPLC-MS/MS法,可測定淡水魚中的地西泮、奧沙西泮,本方案使用乙腈提取,用氯化鈉和硫酸鈉除水,ProElut® C18-U固相萃取柱凈化,Endeavorsil® C18色譜柱分離檢測,內(nèi)標(biāo)法定量,定量限回收率在90%-110%之間。

 

本方案使用了C18-U小柱凈化,增強(qiáng)了目標(biāo)物在小柱上的保留,提高了化合物絕對回收率,保證了實(shí)驗結(jié)果穩(wěn)定性。

 

01
適用范圍

本方案適用淡水魚中地西泮和奧沙西泮殘留量的檢測,定量限1μg/kg。

02
標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 地西泮和奧沙西泮儲備液:分別定量稱取地西泮和奧沙西泮標(biāo)準(zhǔn)品,分別用50%乙腈水稀釋并定容,得到濃度為1mg/mL的單標(biāo)儲備液。

(2) 混標(biāo)中間液:準(zhǔn)確吸取適量地西泮和奧沙西泮儲備液,用50%乙腈水稀釋并定容,配置成濃度為1.0μg/mL的混標(biāo)中間液。

(3) 混標(biāo)工作液:準(zhǔn)確吸取適量混標(biāo)中間液,用50%乙腈水稀釋并定容,配置成濃度為0.1μg/mL的混標(biāo)工作液。

(4) D5-地西泮、D5-奧沙西泮混合內(nèi)標(biāo)工作液:分別定量吸取D5-地西泮和D5-奧沙西泮標(biāo)準(zhǔn)品,用50%乙腈水稀釋并定容,配置成濃度為0.2μg/mL的混合內(nèi)標(biāo)工作液。

03
提取

稱取2g樣品于50mL離心管中,加入50μL混合內(nèi)標(biāo)工作液,加入10mL乙腈,渦旋10min,加入1g氯化鈉和4g硫酸鈉(Cat.#:64616s),6000r/min離心5min,轉(zhuǎn)移上清至15mL離心管中,殘渣用5mL乙腈重復(fù)提取一次,合并上清液。40℃水浴中氮吹至干,用3mL 40%甲醇水溶液復(fù)溶,待凈化。

04
凈化

ProElut® C18-U 500mg/3mL (Cat.#:63504)

(1)活化:用3mL甲醇和3mL水活化

(2)上樣:備用液全部過柱,棄去流出液;

(3)淋洗:用3mL 40%甲醇水淋洗,真空抽干1min,棄去流出液;

(4)洗脫:加入3mL甲醇洗脫,收集洗脫液;

(5)重新溶解:將洗脫液在40℃水浴下氮吹至干,用40%甲醇水定容至1.0mL,混勻,過Nylon膜(Cat.#:37177),上機(jī)分析。

05
色譜條件

(1) UPLC條件

色譜柱:Endeavorsil® C18 50x2.1mm, 1.8μm (Cat.#:87002)

流速:0.3mL/min

進(jìn)樣量:5μL

柱溫:40℃

流動相:A: 0.1%甲酸水  B:甲醇

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(2) 質(zhì)譜條件

電離模式:ESI

掃描方式:正離子掃描

檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓:5500V

霧化氣壓力:50psi

輔助氣壓力:50psi

氣簾氣壓力:20psi

離子源溫度:500℃

圖片

06
添加回收結(jié)果及譜圖

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